В предыдущей главе («Агрегация тромбоцитов») мы рассмотрели два клинических случая, в которых при использовании традиционного метода подсчета тромбоцитов были получены некорректные низкие значения PLT. После повторного анализа проб на гематологическом анализаторе Mindray в режиме RET был получен более достоверный результат - PLT-O, что позволило поставить правильный диагноз.
\r\n

Теперь давайте рассмотрим, как технологии Mindray решают проблему агрегации тромбоцитов in-vitro.
\r\n

ЭДТА-зависимая псевдотромбоцитопения (EDTA-PTCP) возникает под действием антикоагулянтов ЭДТА и является лабораторным феноменом. В процессе EDTA-PTCP происходит агрегация тромбоцитов in-vitro , что может привести к низким значениям тромбоцитов в анализе крови и, как следствие, к неверной постановке диагноза и назначению некорректного лечения пациенту.

В предыдущей главе («Агрегация тромбоцитов») мы рассмотрели два клинических случая, в которых при использовании традиционного метода подсчета тромбоцитов были получены некорректные низкие значения PLT. После повторного анализа проб на гематологическом анализаторе Mindray в режиме RET был получен более достоверный результат - PLT-O, что позволило поставить правильный диагноз.

Теперь давайте рассмотрим, как технологии Mindray решают проблему агрегации тромбоцитов in-vitro.

Выделяют три стадии агрегации тромбоцитов: неактивированный тромбоцит, активированный тромбоцит и агрегированный тромбоцит. Наибольшее значение для агрегации тромбоцитов имеет их активация.^[1]
\r\n

Каковы критические факторы, способствующие агрегации тромбоцитов in-vitro?

Выделяют три стадии агрегации тромбоцитов: неактивированный тромбоцит, активированный тромбоцит и агрегированный тромбоцит. Наибольшее значение для агрегации тромбоцитов имеет их активация.^[1]

Кроме того, были проведены исследования соответствующих антагонистов рецепторов для блокирования регуляторного пути и дезагрегации тромбоцитов. В результате были обнаружены несколько видов антагонистов рецепторов, успешно блокирующих агрегацию тромбоцитов.
\r\n

Таким образом, проблему агрегации тромбоцитов можно решить блокированием процесса их активации. Для выявления механизма активации тромбоцитов были проведены исследования субклеточной структуры и путей передачи сигналов на клеточном уровне. Было обнаружено три основных регуляторных пути активации тромбоцитов: через кальций, триозинкиназу, гликопротеин GPIIb/IIIa.^[2]

Кроме того, были проведены исследования соответствующих антагонистов рецепторов для блокирования регуляторного пути и дезагрегации тромбоцитов. В результате были обнаружены несколько видов антагонистов рецепторов, успешно блокирующих агрегацию тромбоцитов.

Без антагониста рецепторов (два тромбоцита агрегируются)
\r\n

Фибриноген и другие факторы

Без антагониста рецепторов (два тромбоцита агрегируются)

С антагонистом рецепторов (агрегация невозможна)
\r\n

Как показано ниже, добавление антагонистов к пробам с высокой чувствительностью к антагонистам рецепторов до агрегации может предотвратить ее наступление. Добавление антагонистов после агрегации способствует дезагрегации тромбоцитов.
\r\n

Блокада рецепторов

С антагонистом рецепторов (агрегация невозможна)

Как показано ниже, добавление антагонистов к пробам с высокой чувствительностью к антагонистам рецепторов до агрегации может предотвратить ее наступление. Добавление антагонистов после агрегации способствует дезагрегации тромбоцитов.

В рамках дополнительного исследования для изучения молекулярного механизма и характеристик различных радикальных групп были применены методы молекулярной биологии. Из тысяч возможных химических соединений были выявлены несколько оптимальных веществ, содержащих радикальные группы, с высокой эффективностью блокирующие все три регуляторных пути.
\r\n

Однако исследование различных видов проб показало, что некоторые пробы остаются не чувствительны к антагонистам. Дело в том, что эти антагонисты работают только с одним регуляторным путем и оказывают ограниченное влияние на два других пути.

В рамках дополнительного исследования для изучения молекулярного механизма и характеристик различных радикальных групп были применены методы молекулярной биологии. Из тысяч возможных химических соединений были выявлены несколько оптимальных веществ, содержащих радикальные группы, с высокой эффективностью блокирующие все три регуляторных пути.

Для подтверждения влияния этих антагонистов на дезагрегацию тромбоцитов был проведен сравнительный эксперимент с контрольной группой и группой с заблокированными антагонистами. Результаты эксперимента:

Кроме того, существуют три критических фактора (pH, температура, механическое смешивание), которые усиливают дезагрегацию тромбоцитов. В связи с этим не вызывает сомнений эффект совместного действия этих факторов. Таким образом, благодаря совместному влиянию нескольких факторов агрегированные тромбоциты разъединяются, что позволяет получить точный результат подсчета.
\r\n

Функция дезагрегации тромбоцитов реализована в режиме RET анализаторов BC-6800/BC-6200/BC-6800Plus/CAL 6000/CAL 8000. Чтобы узнать больше об этих приборах, нажмите здесь.
\r\n

В результате эксперимента мы обнаружили, что антагонисты, содержащие специфичные радикальные группы, оказывают очевидное влияние на дезагрегацию тромбоцитов.

Кроме того, существуют три критических фактора (pH, температура, механическое смешивание), которые усиливают дезагрегацию тромбоцитов. В связи с этим не вызывает сомнений эффект совместного действия этих факторов. Таким образом, благодаря совместному влиянию нескольких факторов агрегированные тромбоциты разъединяются, что позволяет получить точный результат подсчета.

Функция дезагрегации тромбоцитов реализована в режиме RET анализаторов BC-6800/BC-6200/BC-6800Plus/CAL 6000/CAL 8000. Чтобы узнать больше об этих приборах, нажмите здесь.

[1] The Platelet Membrane Glycoprotein IIb/IIIа Complex, David R. Phillips, etc.,Annals of the New York Academy of Science(509), 177-187
\r\n

[2] Ilya Reviakine. New horizons in platelet research: Understanding and harnessing platelet functional diversity[J]. Clinical Hemorheology and Microcirculation,2015,60:133-152

Список литературы:

[1] The Platelet Membrane Glycoprotein IIb/IIIа Complex, David R. Phillips, etc.,Annals of the New York Academy of Science(509), 177-187

[2] Ilya Reviakine. New horizons in platelet research: Understanding and harnessing platelet functional diversity[J]. Clinical Hemorheology and Microcirculation,2015,60:133-152